Merite extraordinare ale ELISA ultrasensibil cu cicluri tio-NAD în determinarea proteinei Dengue NS1
1. Introducere
Dengue este o boală infecțioasă acută cauzată deVirusul dengue prin mușcătura unei specii infectate de țânțar Aedes (Ae. aegypti sau Ae. albopictus),cu principalele simptome precum febră mare, amețeli, dureri de cap, erupții cutanate șisever Dureri (ochi, mușchi, articulații sau oase) etc. Această boală este larg răspândită în climatele tropicale și subtropicale. Se estimează că între 100 și 400 de milioane de persoane sunt infectate în fiecare an, în timp ce peste 80% sunt de obicei ușoare și asimptomatice. Cu toate acestea, dengue severă poate crește riscul de deces dacă nu este tratată corespunzător. Astfel, diagnosticul precoce al acestei boli este semnificativ pentru tratamentul ei la timp necesar.Este demn de remarcat că proteina non-structurală 1 (NS1), o glicoproteină foarte conservată, este secretată în principal în timpul infecției cuDengueVirus, care este considerată intens principalul factor patogenezal alFebra dengue. Prin urmare, NSI este folosit în general ca biomarker pentru detectarea timpurie a acestei boli.
În acest studiu, un test imunosorbent legat de enzime sandwich (ELISA) în combinație cuThio nicotinamida adenină Dinucleotid (tio-NAD/S-NAD)Metoda de ciclare (de acum înainte, denumită ELISA ultrasensibilă) este utilizat pentru a detecta NSI, urmat de comparație cu NAAT pentru a confirma acuratețea detectării.
2. Avantaje și dezavantaje ale metodelor tradiționale de detectare pentruFebra dengue
În prezent, tIată patru metode principale de detecțiepentru Febră dengue.
Izolarea virală și identificarea au o specificitate ridicată, dar consumă mult timp, durând cel puțin 5 zile. The Antigen rapid Testarea este cea mai rapidă și mai eficientă din punct de vedere al costurilor dintre celelalte metode, dar sensibilitatea și specificitatea sunt relativ scăzute. Testul serologic bazat pe IgM și IgG este limitat de numărul de zile de infecție, catheTestul trebuie amânat până la nivelul anticorpilor ajunge la un nivel detectabil.
În clinică, NAAT este adesea aplicat pentru a determinaFebra dengue prin sensibilitatea și specificitatea sa ridicată. Totuși, această metodă este costisitoare, laborioasă și predispusă la fals pozitiv, care trebuie să fie realizată de personalul instruit.Pentru a depăși dezavantajele acestor metode, a fost introdusă o nouă metodă de detecțieELISA ultrasensibil este aplicat în acest studiu.
3. Fluxul de lucru al ELISA ultrasensibil cu ciclul thio-NAD
O pereche de anticorpieste folosită pentru captarea proteinei NS1 din sandwich ELISA și fosfataza alcalinăeste marcat pe anticorpul secundar. Pe lângă anticorpi, există un derivat de androsteron, 3α-hidroxisteroid dehidrogenază, tio-NAD și NADHsunt folosită pentru construirea sistemului de ciclare enzimatică tio-NAD. În timpul reacției de ciclare a thio-NAD, thio-NADH se acumula constant într-un mod triunghiular și putea fi măsurat direct la o absorbție de 405 nm.
4. Comparația dintre ELISA ultrasensibil și NAAT în detectarea proteinei NS1 Dengue
În NAAT, 60 de exemplare sunt pozitive pentru dengue, iar 25 sunt negative pentru dengue. Valoarea pragului de ciclare (CT) NAAT pentru acele probe pozitive la dengue a variat între 12,42 și 31,41.În ELISA ultrasensibil, 59 de probe sunt corespunzător pozitive pentru rezultatele NAAT, în timp ce 25 de probe sunt complet negative pentru rezultatele NAAT.Comparativ cu NAAT, sensibilitatea și specificitatea ELISA ultrasensibilă sunt de 98,3%, respectiv 100% (Tabelul 2). Dintre 60 de probe de pacienți confirmate pentru dengue confirmate cu NAAT, doar 1 probă este negativă în ELISA ultrasensibil. Datele NAAT au arătat că proba este un caz de infecție DENV de tip 4, cu o valoare CT de 21,59. Rezultatele ELISA ultrasensibile sunt aproape în perfect acord cu rezultatele NAAT, cu o valoare kappa de 0,972 (IC 95%: 0,917-1.0).
5. Concluzie
UMetoda ELISA Itrasensitive este ușor de realizat și nu necesită cursanți profesioniști pentru a fi operată. TDetectarea HE poate fi începută imediat după primirea unei mici probe. Este deosebit de potrivit pentru detectarea timpurie aDengueboală în Țări cu venituri mici.Referință
Chen, Po-Kai și colab. "Metodă avansată de detecție pentru proteina NS1 a denguei folosind ELISA ultrasensibilă cu ciclu Thio-NAD." Viruses, vol. 15,9, 1894. 8 sept. 2023, doi:10.3390/v15091894Avantajele produsului și caracteristicileBONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC este ouna dintre puținele întreprinderi dinChina care poate produce Tio-NAD, cu"Bonzyme" Metoda enzimatică integrală (Prietenos cu mediul; Fără reziduuri de solvenți dăunători) și tehnologie unică de purificare în șapte pași "Bonpure". BONTAC integrează cercetarea și dezvoltarea, producția și vânzarea, cu fabrici proprii și o serie de certificări internaționale pentru a asigura o aprovizionare de înaltă calitate și o aprovizionare stabilă cu produse.
