O metodă științifică pentru cuantificarea NMN în probe biologice
1. Introducere
SuplimentareaMononucleotidul nicotinamidă (NMN)pentru a regla în creștereNivel deDinucleotidul de nicotinamidă adenină (NAD+)s-a prezentat ca o intervenție promițătoare împotriva îmbătrânirii. Totuși, încă este o provocare serioasă de a fi preciscuantificăm intermediarele NAD+, NMN în special. Acest studiu are puterea de a introduce o metodă nouă, metodologia LC-MS/MS mediată de două izotopi (dimeLC-MS/MS), pentru cuantificarea precisă aNMN în eșantioane biologice.2. Factori care influențează detectarea precisă a NMN
NMN este greu de detectat cu precizie din cauza vulnerabilității sale la enzimedegradarea, conversia în procesarea probelor, comportamentele sale complexe în diferite condiții de coloană și extracție, precum și efectul matricial.
Mai exact, NMN are proprietăți de polaritate ridicată și volatilitate scăzută, care se dizolvă ușor în apă, dar dificil de dizolvat în solvenți organici. Aceste proprietăți restricționează foarte mult aplicarea multor metode convenționale de analiză cantitativă.
BProbe iologicecum ar fi Sângele poartă activități semnificative ale CD38 și CD73 (ecto-5’-nucleotidază), ambele putând folosi NMN ca substrat.
Comportamentul NMN în coloană este foarte complex, probabil din cauza naturii bipartite a încărcăturilor sale, astfel încât diferențele subtile în extracția și condițiile coloanei afectează semnificativ detectarea fiabilă și precisă a NMN.
3. Strategii de adaptare aledimeLC-MS/MS pentru a reduce impactul factorilor de impact
Pentru a evita interferența factorilor menționați mai sus, un pRototipColoanăNMN-2 se aplică. Această coloanăconțins Particule de silice de înaltă puritate pe bază de C18 care sunt mai capabile să lege compuși hidrofili decât particulele de carbon, îmbunătățind astfel capacitatea de separare.PAcid ercloric (PCA) este angajat deoarece poate extragerea eficientă a NAD+ și NMN din probe biologice, cum ar fi plasma, cu minime Pierderi.
Pentru a ajusta efectele matriciale,a cantitate fixă (1 μM) din fiecare compus izotopicis adăugat labiologic probe înainte de extracția PCA.
4. Avantajuls de dimeLC-MS/MS
Dstandarde NMN izotopice uble, NMN (M + 14) și NMN (M + 5), în metodologia condusă de LC-MS/MS, pot urmări cu precizie soarta NMN în timpul procesării probei, careCrește semnificativ acuratețea și fiabilitatea măsurătorilor NMN în eșantioanele biologice. În plus, dimeLC-MS/MS poate evalua eficiența extracției și concentrațiile absolute de NMN în diferite tipuri de probe biologice.
5. Concluzie
Theste noul LC-MS/MS-metodologie condusă cu standarde duble izotopice NMN poate Accurately și Reliably măsoară NMN în probele biologice. Poate fi folosit pentru studii viitoare privind consumul de NMN.6. Referință
Nu știu, Junya și colab. "Cuantificarea absolută a mononucleotidului nicotinamidă în probe biologice prin cromatografie lichidă mediată dublu-izotopi-spectrometrie de masă tandem (dimeLC-MS/MS)." NPJ AGING, VOL. 10,1, 2. 2 ian. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1De ce să alegiBONTAC?
BONTACeste liderul globaluluiNMNindustrie. Avem prima tehnologie de cataliză enzimatică completă din China și am devenit compania de top în Produse coenzimatice utilizate pe scară largă în industria sănătății, medicină și frumusețe, Agricultură verde, biomedicină și alte domenii. Notabil,BONTAC este NMNfurnizor de materii prime al celebrei echipe David Sinclair de la Universitatea Harvard. Serviciile și produsele noastre sunt de încredere. Mai mult,BONTACareUn independentCoenzimă Centrul de Cercetare în Tehnologia Inginerească la nivel provincial în China și fabricile proprii, unde se pot asigura puritatea și stabilitatea produselor.
