O metodă științifică pentru cuantificarea NMN în probe biologice
1. Introducere
Suplimentarea cunicotinamid mononucleotid (NMN)pentru a creștede NAD+ cu precursori amidati de NADintermediar ala fost dezvăluită ca o intervenție promițătoare anti-îmbătrânire. Cu toate acestea, este încă o provocare serioasă să se cuantifice cu precizieintermediarii NAD+, NMN în special. Acest studiu este conceput pentru a introduce o metodă nouă, metodologia LC-MS/MS mediată de izotopi dubli (dimeLC-MS/MS), pentru cuantificarea precisă aNMN în probe biologice.2. Factori care afectează detectarea precisă a NMN
NMN este dificil de detectat cu precizie din cauza vulnerabilității sale la degradarea enzimatică,conversia în timpul procesării probelor, comportamentul său complex în diferite condiții de coloană și extracție, precum și efectul matricei.
Specific, NMN are proprietăți de polaritate ridicată și volatilitate scăzută, fiind ușor de dizolvat în apă, dar dificil de dizolvat în solvenți organici. Aceste proprietăți restricționează puternic aplicarea multor metode convenționale de analiză cantitativă.
Bprobe biologicecum ar fi sângele prezintă activități semnificative ale CD38 și CD73 (ecto-5’-nucleotidază), ambele putând utiliza NMN ca substrat.
Comportamentul NMN în coloană este foarte complex, probabil din cauza naturii bipartite a sarcinilor sale, astfel încât diferențele subtile în condițiile de extracție și coloană afectează semnificativ detectarea fiabilă și precisă a NMN.
3. Strategii de gestionare adimeLC-MS/MS pentru a reduce impactul factorilor de impact
Pentru a evita interferența factorilor menționați mai sus, se aplică o coloanăprototipcoloanăNMN-2 . Această coloanăconține (NMN particule de silice de înaltă puritate pe bază de C18 care sunt mai capabile să lege compușii hidrofili decât particulele de carbon, îmbunătățind capacitatea de separare.PAcid percloric (PCA) este utilizat deoarece poate extrage eficient NAD+ și NMN din probe biologice precum plasma, cu pierderi minime.
Pentru a ajusta efectele matricei,a o cantitate fixă (1 μM) din fiecare compus izotopicîneste adăugatăprobelor biologice înainte de extracția cu PCA.
4. Avantajul (NMN dimeLC-MS/MS
ÎStandardele duble izotopice NMN, NMN (M + 14) și NMN (M + 5), în metodologia bazată pe LC-MS/MS pot urmări cu precizie soarta NMN în timpul procesării probelor, carecrește semnificativ acuratețea și fiabilitatea măsurării NMN în probe biologice. În plus, dimeLC-MS/MS poate evalua eficiența extracției și concentrațiile absolute ale NMN în diferite tipuri de probe biologice.
5. Concluzie
Acest noua metodologie-bazată pe LC-MS/MS cu standarde duble izotopice NMN fi măsoarăcu precizie și fiabillyNMN în probe biologice. Poate fi utilizată pentru studii viitoare privind aportul de NMN.6. Referințe
Unno, Junya et al. „Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1De ce să alegețiBONTAC?
BONTACeste liderul industrieiNMNglobale. Avem prima tehnologie de cataliză integrală enzimatică din China și am devenit întreprinderea lider în produsele coenzimatice, care sunt utilizate pe scară largă în industria sănătății, medical și frumusețe, agricultura verde, biomedicină și alte domenii. În mod notabil,BONTAC este NMNfurnizorul de materii prime al renumitei echipe David Sinclair de la Universitatea Harvard. Serviciile și produsele noastre sunt demne de încredere. În plus,BONTACareun centru independentcoenzim de cercetare în inginerie tehnologică la nivel provincial în China și fabrici proprii, unde puritatea și stabilitatea produselor pot fi asigurate.
