O metodă științifică de cuantificare a NMN în probe biologice
1. Introducere
Suplimentareanicotinamidă mononucleotidă (NMN)pentru a regla în sus nivelul de nicotinamidă adenină dinucleotidă (NAD+) a fost dezvăluită ca fiind o intervenție anti-îmbătrânire promițătoare. Cu toate acestea, este încă o provocare serioasă să cuantificăm cu acuratețe intermediarii NAD+,NMNîn special. Acest studiu este capabil să introducă o metodă nouă, metodologia LC-MS/MS mediată de izotopi dubli (dimeLC-MS/MS), pentru cuantificarea precisă aNMNîn probe biologice.
2. Factori care afectează detectarea precisă a NMN
NMN este greu de detectat cu precizie din cauza vulnerabilității sale la degradarea enzimatică, conversia în procesarea probelor, comportamentele sale complexe în diferite condiții de coloană și extracție, precum și efectul matricei.
Mai exact, NMN are proprietățile de polaritate ridicată și volatilitate scăzută, care este ușor de dizolvat în apă, dar dificil de dizolvat în solvenți organici. Aceste proprietăți restricționează foarte mult aplicarea multor metode convenționale de analiză cantitativă.
BEșantioane iologicede exemplusângele poartă activități semnificative ale CD38 și CD73 (ecto-5’-nucleotidaza), ambele putând utiliza NMN ca substrat.
Comportamentul NMN în coloană este foarte complex, probabil din cauza naturii bipartite a sarcinilor sale, astfel încât diferențele subtile în extracție și condițiile coloanei afectează semnificativ detectarea fiabilă și precisă a NMN.
3. Strategiile de adaptare adimeLC-MS/MSpentru a reduce impactul factorilor de impact
Pentru a evita interferența factorilor menționați mai sus, se aplică o coloană prototip NMN-2. Această coloană conține particule de silice de înaltă puritate pe bază de C18, care sunt mai capabile să lege compușii hidrofili decât particulele de carbon, îmbunătățind capacitatea de separare.
Acidul percloric (PCA) este utilizat deoarece poate extrage eficient NAD+ și NMN din probe biologice, cum ar fi plasma, cu pierderi minime.
Pentru a ajusta efectele matricei, o cantitate fixă (1 μM) din fiecare compus izotopic este adăugată la probele biologice înainte de extracția PCA.
4. Avantajulsde dimeLC-MS/MS
Standardele NMN izotopice duble, NMN (M + 14) și NMN (M + 5), în metodologia bazată pe LC-MS/MS pot urmări cu precizie soarta NMN în timpul procesării probelor, ceea ce crește semnificativ acuratețea și fiabilitatea măsurării NMN în probele biologice. În plus, dimeLC-MS/MS poate evalua eficiența extracției și concentrațiile absolute de NMN în diferite tipuri de probe biologice.
5. Concluzie
Thenoul LC-MS/MS-Metodologia condusă cu standarde NMN izotopice duble poate măsura cu precizie și fiabilitate NMN în probe biologice.Poate fi utilizat pentru studii viitoare privind aportul de NMN.
6. Referință
Unno, Junya et al. "Cuantificarea absolută a mononucleotidei de nicotinamidă în probe biologice prin cromatografie lichidă mediată de izotopi dubli-spectrometrie de masă în tandem (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2 ianuarie 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
De ce să alegiBONTAC?
BONTACeste liderulNMNindustrie. Avem prima tehnologie de cataliză cu enzime întregi din China și am devenit cea mai importantă întreprindere în produse cu coenzime care sunt utilizate pe scară largă în industria sănătății, medicală și frumusețe, agricultură verde, biomedicină și alte domenii. În special, BONTAC este NMNfurnizor de materii prime al faimoasei echipe David Sinclair de la Universitatea Harvard. Serviciile și produsele noastre sunt de încredere. Mai multBONTACare un centru independent de cercetare în tehnologia ingineriei coenzimelor la nivel provincial din China și fabrici proprii, unde pot fi asigurate puritatea și stabilitatea produselor.
Disclaimer
Thearticolul esteBaza referința dinRevista academică. Informațiile relevante suntprestadoar în scopuri de partajare și învățare și nu reprezintă niciun scop de consiliere medicală. Dacă există vreo încălcare, vă rugămcontactautorulpentruDeletion. Opiniile exprimate în acest articol nu reprezintă pozițiaBONTAC.