Există trei gazde de expresie de Escherichia coli, drojdie și Streptomyces. Următorul este procesul de dezvoltare a exprimării proteinelor în Escherichia coli.
1.Selectați promotorii, etichetele și vectorii (promotori, etichete, vectori)
Personalul de bază de cercetare și dezvoltare are mulți ani de experiență în biocataliză, biologie structurală și evoluție dirijată și a publicat lucrări în reviste cunoscute precum PNAS, PLoS Pathogens, FEBS J, JMB, JAFC, Biotechnology for Biofuels etc. Am integrat proiectarea (semi-) rațională, evoluția dirijată, fuziunea multienzimatică și alte metode de inginerie enzimatică pentru a schimba nivelul de expresie, stabilitatea termică, specificitatea substratului și eficiența catalitică a enzimelor. În prezent, a fost aplicat în multe proiecte pentru substanțe precum factorul coenzimatic, glicozida steviolică RD și psicoza.
Pentru in vitro Cataliza enzimatică, am dezvoltat independent o varietate de rășini de purificare și rășini imobilizate potrivite pentru producția de masă. Grupurile comune includ NTA, IDA, epoxidice, amino și grupuri compozite. Diferite substraturi de rășină pot fi, de asemenea, examinate în funcție de proprietățile proteinelor și condițiile de reacție.
Dacă substraturile și produsele pot intra și ieși liber din celule și nu sunt ușor degradate de enzimele hibride, cataliza celulelor întregi este adesea cea mai bună alegere.
Pe baza experienței mature, procesul de optimizare a condițiilor de reacție, inclusiv pH-ul de reacție, temperatura de reacție, ionii metalici, concentrația substratului, cantitatea de enzime, timpul de reacție, conservarea întregii celule / enzime și aplicarea poate fi finalizat în aproximativ 1-3 luni.
Pentru in vitro Cataliza enzimatică, am dezvoltat independent o varietate de rășini de purificare și rășini imobilizate potrivite pentru producția de masă. Grupurile comune includ NTA, IDA, epoxidice, amino și grupuri compozite. Diferite substraturi de rășină pot fi, de asemenea, examinate în funcție de proprietățile proteinelor și condițiile de reacție.
Dacă substraturile și produsele pot intra și ieși liber din celule și nu sunt ușor degradate de enzimele hibride, cataliza celulelor întregi este adesea cea mai bună alegere.